Antinukleära antikroppar (ANA)

Antinukleära antikroppar är en del av den komplexa diagnostiska processen för systemiska bindvävssjukdomar. Den komplexa mekanismen för bildandet av antinukleära antikroppar gör tolkningen av deras resultat svår, och närvaron eller frånvaron av en viss antikropp indikerar inte alltid en sjukdomsprocess. Vilka är de typer av antinukleära antikroppar? När ska testet utföras?

Innehållsförteckning:

1. Antinukleära antikroppar - typer
2. Antinukleära antikroppar - bildning och verkningsmekanism
3. Antinukleära antikroppar - indikationer för studien
4. Antinukleära antikroppar - vad är testet?
5. Antinukleära antikroppar - hur ska man tolka resultatet?

Anti-nukleära antikroppar (ANA) är autoantikroppar riktade mot element i cellkärnan, t.ex. DNA och cytoplasma. De är en av de mest varierande och mest studerade antikropparna.

Antinukleära antikroppar - typer

• antikroppar mot extraherbara nukleära antigener (anti-ENA):
• mot DNA-topoisomeras I (anti-Scl70)
• mot ribonukleoprotein (anti-RNP)
• mot Smith-antigen (anti-Sm)
• anti-Mi2 / Mi-2
• anti-Ro (SS-A)
• anti-La
• anti-Jo1
• anti-PM-Scl
• anti-Kn
• antikroppar mot kärnporbildande protein gp-2010 (anti-gp-210)
• antikroppar mot nativt dubbelsträngat DNA (anti-dsDNA)
• anti-centromera antikroppar (anti-ACA)

Antinukleära antikroppar - bildning och verkningsmekanism

Autoimmunitet är ett onormalt svar från immunsystemet mot sina egna vävnader, vilket resulterar i autoimmuna sjukdomar.

Olika mekanismer för autoimmunitet har beskrivits, varav en är frisättningen av antigener dolda från immunsystemet, t ex som ett resultat av inflammatorisk vävnadsskada.

Sedan frigörs element som finns i cellkärnan, t.ex. DNA, RNA, histoner, som immunsystemet börjar känna igen som något främmande och producerar anti-nukleära antikroppar mot dem.

Antinukleära antikroppar - indikationer för studien

• misstanke om bindvävssjukdomar:
• systemisk lupus erythematosus (närvaro av antikroppar hos 95-100% av patienterna; anti-dsDNA-antikroppar är en specifik sjukdomsmarkör)
• läkemedelsinducerad lupus (95-100% av patienterna)
• antifosfolipidsyndrom (40-50% av patienterna)
• systemisk sklerodermi (80-95% av patienterna, särskilt anti-Scl70-antikroppar)
• polymyosit och dermatomyosit (40-80% av patienterna, särskilt anti-Jo1 och anti-Mi2 antikroppar)
• Sjögrens syndrom (48-96% av patienterna, särskilt anti-Ro och anti-La antikroppar)
• reumatoid artrit (cirka 10% av patienterna)
• juvenil idiopatisk artrit (mindre än 10% av patienterna)
• Raynauds syndrom (20-60% av patienterna)
• fibromyalgi (15-25% av patienterna)
• blandade bindvävssjukdomar (95-100% av patienterna)
• bedömning av sjukdomsaktivitet och övervakning av behandlingseffektivitet, t.ex. anti-dsDNA-antikroppar i systemisk lupus erythematosus
• korrelera närvaron av antikroppar med förekomsten av specifika symtom på sjukdomen, t.ex. Sjögrens syndrom och närvaron av anti-Ro- och anti-La-antikroppar
• förutsäger sjukdomen i framtiden

Antinukleära antikroppar - vad är testet?

För bestämning av antinukleära antikroppar fastas blod som tas från armbågsböjningen.

Metoderna för bestämning av antikropparna är mycket olika och beror på typen av antinukleär antikropp som mäts. Dessa är huvudsakligen immunologiska metoder såsom:

• ELISA
• RIA
• indirekt immunfluorescens
• metod för dubbel immundiffusion
• Western blot

Vid antinukleära antikroppar används en tvåstegsdiagnos. Först utförs ett screeningtest med den indirekta immunofluorescensmetoden, som kännetecknas av hög känslighet.

Den indirekta immunfluorescensmetoden består i att immobilisera HEp-2-celler härledda från humana epitelceller på ett mikroskopglas.

Celler av denna linje har i sina cytoplasma och cellkärnantigener som binder patologiska antikroppar från patientens blod.

Efter att ha lagt patientens serum till glaset binder de antinukleära antikropparna till specifika antigener och är synliga under mikroskopet tack vare speciella fluorescerande markörer.

Fördelen med indirekt immunfluorescens är möjligheten att differentiera typerna av antikroppar på basis av typen av belysning av det fluorescerande färgämnet.

Till exempel indikerar glödning av kärnan av den homogena typen närvaron av anti-dsDNA eller anti-ssDNA-antikroppar.

Ett positivt screeningtestresultat måste alltid bekräftas. För detta ändamål används mycket specifika immunologiska metoder, t.ex. western blot. Efter detektering av närvaron och identifiering av typen av antinukleär antikropp bestäms dess titer, dvs den högsta utspädningen av serumet vid vilket närvaron av antikroppar kan detekteras.

Antinukleära antikroppar - hur ska man tolka resultatet?

Korrekt titer av antinukleära antikroppar bör ligga under 1:40.

Om screeningtestet för antinukleära antikroppar är negativt och det inte finns några kliniska symtom som tyder på systemisk bindvävssjukdom, bör diagnosen inte utvidgas till att omfatta specifika antikroppar, t.ex. anti-dsDNA, anti-Sm.

Kliniskt relevanta titrar hos vuxna anses vara ≥ 1: 160 och hos barn ≥ 1:40.

Vid positiva resultat föreslås att testresultatet ska tolkas på följande sätt:

• titer 1: 40-1: 80 - gränsresultat (svagt positivt), i frånvaro av kliniska symtom på bindvävssjukdomar, rekommenderas det inte att upprepa testet eller utföra ett uppföljningstest, eftersom resultaten hos de flesta inte förändras under åren
• titer 1: 160-1: 640 - medel positivt resultat, i avsaknad av kliniska symtom på bindvävssjukdomar, rekommenderas det att upprepa testet efter 6 månader
• titer ≥ 1: 1280 - högt positivt resultat, i närvaro av kliniska symtom på bindvävssjukdomar, krävs ytterligare specialistdiagnos för att diagnostisera sjukdomen

Man bör komma ihåg att serologisk testning av antinukleära antikroppar är en del av en komplex diagnostisk process, och ett positivt resultat måste alltid tolkas i samband med den kliniska bilden och förekomsten av de karakteristiska symptomen på sjukdomen.

Antinukleära antikroppar med låga titer finns hos 5% av den friska befolkningen och frekvensen ökar med åldern.

Dessutom finns deras närvaro i fysiologiska och patofysiologiska tillstånd där antinukleära antikroppar inte har någon diagnostisk betydelse:

• infektioner, t.ex. tuberkulos, syfilis, malaria
• leversjukdom, t.ex. levercirros
• lungsjukdomar, t.ex. sarkoidos, asbestos
• cancer t.ex. leukemi, lymfom, bröstcancer, melanom
• hudsjukdomar, t.ex. psoriasis, lichen planus
• efter organtransplantation, t.ex. hjärttransplantation, njurtransplantation
• användning av läkemedel, t.ex. antiepileptika, hydralazin, litiumsalter,
• andra autoimmuna sjukdomar, t.ex. Hashimotos sjukdom, Addisons sjukdom, typ I-diabetes
• graviditet (upp till 20% av gravida kvinnor)

Värt att veta...

Etnisk variation karaktäriserar uppkomsten av olika typer av antinukleära antikroppar.

Till exempel är kaukasiska patienter med systemisk skleros mer benägna att ha anti-ACA-antikroppar, och afroamerikaner och afrikaner är mer benägna att ha topoisomeras-reaktiva antikroppar.

Rekommenderad artikel:

ANA (Antinuclear Antibody) Diagnostic Test

Litteratur

1. Fischer K. et al. Autoantikroppar i reumatologisk praxis. Forum Reumatol. 2016, 2, 1, 39–50.
2. Interna sjukdomar, redigerad av Szczeklik A., Medycyna Praktyczna Kraków 2010
3. Laboratoriediagnos med inslag av klinisk biokemi. Handbok för medicinska studenter redigerad av Dembińska-Kieć A. och Naskalski J.W., Elsevier Urban & Partner Wydawnictwo Wrocław 2009, 3: e upplagan

Om författaren

Karolina Karabin, doktor, doktor, molekylärbiolog, laboratoriediagnostiker, Cambridge Diagnostics Polska Utbildad som biolog med inriktning mot mikrobiologi och laboratoriediagnostiker med över 10 års erfarenhet av laboratoriearbete. En examen från skolan för molekylär medicin och medlem av det polska samhället för human genetik. Chef för forskningsbidrag vid laboratoriet för molekylär diagnostik vid institutionen för hematologi, onkologi och inre sjukdomar vid det medicinska universitetet i Warszawa. Hon försvarade titeln doktor i medicinska vetenskaper inom medicinsk biologi vid den första medicinska fakulteten vid Warszawas medicinska universitet. Författare till många vetenskapliga och populärvetenskapliga arbeten inom laboratoriediagnostik, molekylärbiologi och näring. Som specialist på laboratoriediagnostik driver han dagligen den materiella avdelningen vid Cambridge Diagnostics Polska och samarbetar med ett team av dietister på CD Dietary Clinic. Han delar sin praktiska kunskap om diagnostik och dietterapi av sjukdomar med specialister på konferenser, utbildningar och i tidningar och webbplatser. Hon är särskilt intresserad av modern livsstils påverkan på molekylära processer i kroppen.

Läs fler artiklar av denna författare