Flödescytometri är en diagnostisk och forskningsteknik som är känd under många år och används ofta inom onkologi. Flödescytometri gör det möjligt att undersöka cellerna som utgör suspensionen i en laminär eller stratifierad, flytande ström med en anordning som kallas flödescytometer. Vad är indikationerna för flödescytometri och hur görs det?
Flödescytometri används vid diagnos av hematologiska neoplasmer eftersom de är flytande tumörer, men det är bara en hjälpmetod. Det är dock värt att komma ihåg att det finns en cancer som endast kan diagnostiseras med denna metod. Detta är kronisk lymfocytisk leukemi.
I andra neoplastiska sjukdomar används flödescytometri som ett diagnostiskt hjälpmedel eftersom det visar mycket viktiga egenskaper hos neoplastiska celler. Denna metod används också för att bedöma effektiviteten av den behandlade behandlingen.
Flödescytometri - vad visar den?
Vätskeflödet som innehåller testpartiklarna passeras med en konstant hastighet (100-2000 partiklar per sekund) genom cytometerns mätområde. Här analyserar optiska metoder former, dimensioner, cellernas interna struktur och deras innehåll, t.ex. DNA. Alla celler är optiskt märkta.
Mätningarna baseras på spridningsegenskaperna hos laserljus av enskilda celler eller deras komponenter (kärnor, kromosomer, mitokondrier) eller den fluorescens som induceras av dem.
Optiska signaler omvandlas till elektriska signaler, som efter analys presenteras grafiskt som mono- eller biparametriska fördelningar.
Cytometern möjliggör också partikelsegregering efter att ha lämnat mätzonen. Det kan sägas att apparaten arrangerar (segregerar) celler med samma beståndsdelar (preparativ sortering) eller isolerar vissa typer av celler (analytisk sortering).
Flödescytometri möjliggör studier av cellernas populationsegenskaper, analys av cellulära komponenter (särskilt nukleinsyror, proteiner, yt- och cellantigener), enzymatisk aktivitet, membranpotential, mitokondriell aktivitet, intracellulärt pH, jontransport och membranfluiditet.
Flödescytometri - applikation
Flödescytometrin som används i diagnostik gör det möjligt att bestämma fenotypen av neoplastiska celler och uttrycket av enskilda proteiner. För att uppnå detta används märkta fluorescerande antikroppar som binder på ett karakteristiskt sätt till antigener på ytan av cellmembranet. Tack vare detta är det möjligt att bestämma graden av deras differentiering, ursprung, prognostiska och terapeutiska markörer, vilket underlättar beslutet om ytterligare diagnostiska och terapeutiska procedurer.
En annan applikation för flödescytometri är att övervaka effektiviteten av den behandling som tillämpas genom att bedöma den så kallade "kvarvarande sjukdom", som är procentandelen celler med tumörliknande fenotyper som finns kvar efter behandling.
Flödescytometri underlättar också forskning om cancer. Tack vare denna metod är det möjligt att söka efter t.ex. receptorer som ligger på ytan av neoplastiska celler och kan bli mål för behandling.
Metoden gör det möjligt att utvärdera aktiviteten hos proteiner i cellen. Det är också möjligt att utvärdera cellcykeln, t.ex. genom att bestämma mängden DNA i cellen.
Under proliferationsprocessen passerar en cell genom cellcykeln genom faser där den fördubblar mängden DNA. Genom att bedöma denna mängd är det möjligt att ange vilken fas cellerna befinner sig i, om de sprider sig eller inte, eller om de går i apoptos. Med andra ord, med hjälp av flödescytometri kan du ta reda på om cellerna förbereder sig för apoptos, den programmerade dödsprocessen.
Flödescytometri - framtiden
Flödescytometri har varit känd och används inom medicin i flera decennier. Det förbättras dock ständigt och skapar nya diagnos- och forskningsmöjligheter. Under den första perioden med användning av denna metod var det endast möjligt att bestämma storleken och graden av granularitet hos celler.
Användningen av laserljus i flödescytometri-enheter gör att du kan excitera vissa fluorescerande markörer och sedan utvärdera deras emission. Moderna cytometrar tillåter en betydande ökning av antalet markörer som bedöms samtidigt, vilket definitivt innebär en ökning av känsligheten hos denna metod.
Det är därför det används inte bara vid diagnos av neoplastiska sjukdomar utan också för att bedöma effektiviteten av behandlingen.
Om författaren
Läs fler artiklar av denna författare
